La fissazione-eluizione è una tecnica utilizzata in immunoematologia di laboratorio , per abbassare gli antigeni identificati sulla superficie degli eritrociti .
Alcuni gruppi sanguigni , infatti, non possono essere rilevati dalle reazioni di agglutinazione normalmente utilizzate. Sebbene non siano o non siano molto agglutinabili dal siero di prova utilizzato, i globuli hanno comunque l'antigene sulla loro superficie. In questo caso sono molti i cosiddetti gruppi sanguigni deboli come A3, Ax, Am, Ael ... Bx, Bm ... D u , C * ...
La tecnica di fissazione-eluizione prevede che il siero in esame agisca sui globuli rossi. L'anticorpo contenuto nel siero si lega ai globuli se questi hanno l'antigene corrispondente alla loro superficie, ma non causa l'agglutinazione normalmente osservata. Questo legame dell'anticorpo al suo antigene, che non provoca una reazione visibile, costituisce il primo stadio della tecnica.
Il legame antigene - anticorpo è un legame reversibile, con una costante di associazione che dipende da vari parametri, in particolare la temperatura.
In secondo luogo, dopo il "lavaggio" dei globuli rossi, vale a dire l'eliminazione del siero in esame che circonda i globuli rossi, l'anticorpo può essere eluito (vale a dire staccato dal globulo, con vari metodi fisici. Sostanze chimiche, calore, etere, soluzione acida ...) quindi recuperati, dopo centrifugazione , nel liquido di sospensione dei globuli (soluzione di eluizione, o soluzione fisiologica a 9 g / l di NaCl , se tecnica a caldo). Questo liquido supernatante, chiamato eluato , viene quindi testato contro i globuli rossi che trasportano un gruppo normale e quindi agglutinabile. L'agglutinazione di questi globuli di prova dimostra la presenza dell'anticorpo nell'eluato, un anticorpo che può essere presente solo se si è precedentemente attaccato all'antigene corrispondente dei globuli rossi analizzati. Ciò dimostra che questi ultimi, sebbene non agglutinabili, erano effettivamente portatori dell'antigene del gruppo sanguigno desiderato.
Questa tecnica è molto sensibile e permette, in modo semplice, di evidenziare la maggior parte dei gruppi sanguigni deboli. In caso di fallimento di questa tecnica e per alcuni casi specifici che richiedono una risposta (apparente anomalia della filiazione, problema trasfusionale , ricerca di nuovi alleli, ecc.), È ora possibile ricorrere alla biologia molecolare .