Endonucleasi

Un'endonucleasi è una nucleasi , che taglia un acido nucleico in frammenti più corti. Le endonucleasi sono in grado di tagliare a metà della catena, a differenza delle esonucleasi che attaccano solo i nucleotidi situati alle estremità dei frammenti.

Alcune endonucleasi chiamate endonucleasi di restrizione sono enzimi di restrizione che tagliano un filamento di DNA a doppia elica in punti caratterizzati da una specifica sequenza di nucleotidi  : il sito di restrizione. Stiamo parlando della digestione del DNA.

Nella nomenclatura CE , questi enzimi sono classificati nei gruppi che vanno da EC3.1.21 a EC3.1.27, i primi cinque corrispondenti alle endodesossiribonucleasi e gli ultimi due alle endoribonucleasi .

Utilizza

Una volta che il filamento di DNA è stato tagliato, possiamo trovarci in due casi:

• estremità coesiva, con bordi smussati, l'enzima taglia nello stesso punto sui 2 fili come nel caso di Hae III che taglia GG / CC. In questo caso, i fili così creati non possono ricombinare.
• estremità coesive, con bordi appiccicosi, l'enzima di restrizione non taglia nel mezzo della sua sequenza di restrizione, come nel caso di Eco RI che riconosce la sequenza G / AATTC.

Da identiche estremità non coesive, è possibile assemblare due frammenti di DNA con l'uso di una ligasi . Questo può essere utilizzato, ad esempio, per inserire una sequenza di DNA in un plasmide per generare un vettore di espressione.

Cas9 è un'endonucleasi utilizzata per modificare facilmente e rapidamente il genoma delle cellule animali e vegetali

Note e riferimenti

1. CHUPS - Biologia genica - Obiettivi durante la formazione di base IFTAB ( 2 °  anno) Diploma universitario P. e M. Curie Formazione continua

Articoli Correlati

• Nuclease
  • Esonucleasi
  • Endonucleasi
• Desossiribonucleasi
  • endodesossiribonucleasi
  • Esodesossiribonucleasi
• Ribonucleasi
  • Endoribonucleasi
  • Exoribonuclease

Altro

• Meganucleasi
• Enzima di restrizione